БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 4, с. 727–736
УДК 577.152.1
Взаимодействие глицеральдегид-з-фосфатдегидрогеназы с низкомолекулярными тиолами
Поступила в редакцию 19.10.1995
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, гидролиз ацил-фермента, низкомолекулярные тиолы.
Аннотация
Реакция окисления глицеральдегид-3-фосфата, катализируемая глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназой в отсутствие неорганического фосфата, приводит к образованию комплекса 3-фосфоглицероил-энзим∙NADН, который, после обмена NADH на NAD, подвергается гидролизу. Гидролиз резко замедляется в присутствии низкомолекулярных тиолов (цистеина, восстановленного глутатиона, дитиотреитола), добавленных в концентрациях, сопоставимых с концентрациями активных центров фермента. С использованием [35S] цистеина показано связывание низкомолекулярного тиола с ферментом с максимальной стехиометрией четыре молекулы цистеина на тетрамер. Необходимым условием связывания является присутствие NAD и глицеральдегид-3-фосфата, т.е. образование ацилированной формы фермента. pH-Зависимость связывания [35 S] цистеина сходна с pH-зависимостью влияния восстановленного глутатиона на скорость гидролиза 3-фосфоглицероил-энзима. Результаты интерпретируются в рамках гипотезы, согласно которой ковалентное связывание низкомолекулярного тиола, сопряженное с каталитическим превращением в активном центре фермента, изменяет конформационное состояние комплекса 3-фосфоглицероил-энзим-NAD.