БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 4, с. 721–726
УДК 577.152.1
Участие шаперона DnaK и ATP в сворачивании in vivo люциферазы светляков, синтезируемой клетками E. coli
Поступила в редакцию 18.10.1995
После доработки 08.12.1995
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: ген luc, кинетика экспрессии, люцифераза светляков, белки- шапероны, DnaK, GroEL, полимиксин, Esherichia coli.
Аннотация
Охарактеризована динамика накопления белка и активность люциферазы светляков Luciola mingrelica, синтезирующейся на плазмиде pJGλ в штаммах Е. coli Ώ238 и B178groE7, дефектных по шаперонам DnaK и GroEL соответственно, а также в лишенных указанных мутаций штаммах Ώ237 и W3110. Во всех изученных штаммах синтезируется приблизительно одинаковое количество белка люциферазы (3,0-3,9 % от всех белков клетки), который образуется в каталитически неактивной форме и затем превращается в активную люциферазу при длительной инкубации культуры при 21°. В штамме Ώ238, дефектном по шаперону DnaK, не происходит трансформации люциферазы в каталитически активную форму, что доказывает участие шаперона DnaK в сворачивании вновь синтезированного белка в каталитически активную люциферазу. Процесс сворачивания в каталитически активную форму ускоряется при увеличении концентрации АТР в клетке, что можно достичь путем обработки клеток полимиксином и добавлением АТР в среду.