БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 2, с. 344–356
УДК 577.152.3
Протеолитические ферменты Streptomyces fradiae: металлоэндопептидаза, субтилизиноподобная и трипсиноподобная протеиназы
Поступила в редакцию 07.08.1995
После доработки 23.10.1995
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Streptomyces fradiae, металлоэндопептидаза, субтилизиноподобная протеиназа, трипсиноподобная протеиназа.
Аннотация
Из культуральной жидкости Streptomyces fradiaeс помощью хроматографии на бацитрацин-силохроме, бацитрацин-сефарозе, ДЭАЭ-цсллюлозе и фракционирования сульфатом аммония были выделены, очищены и изучены три протеолитических фермента: металлопротеиназа SFMP и сериновые протеиназы SFSP и SFTP. На основании изучения физико-химических и функциональных свойств, а также структурных исследований установлено, что протеиназа SFMP является цистеинсодержащей металлоэндопептидазой с молекулярной массой 36 кДа. Оптимум действия – при pH 7,0-7,5 и температуре 60-65 °. Фермент стабилен при рH 7,0-9,0 и температуре до 60°. Сериновая протеиназа SFSP относится к субтилизиноподобным ферментам. Ее молекулярная масса равна 29 кДа, оптимум действия – при pH 7,5-8,5 и температуре до 50°. Протеиназа стабильна при pH 4,0—9,0 и сохраняет 30% активности при 70°. Вторая сериновая протеиназа – SFTP, с молекулярной массой 26 кДа, относится к ферментам трипсиноподобного типа. С наибольшей скоростью она расщепляет синтетические субстраты трипсина при pH 6,8-8,8 и 50°. SFTP стабильна при pH 4,5-8,5 и до 50°. Показано, что Streptomyces fradiae, как и Streptomyces griseus и другие стрептомицеты, обладает способностью вырабатывать сериновые протеиназы (SFSP и SFTP), относящиеся к двум эволюционно неродственным семействам сериновых протеиназ – субтилизиновому и химотрипсиновому. Металлоэндопептидаза SFMP и субтилизиноподобная протеиназа SFSP выделены и охарактеризованы впервые.