БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 2, с. 336–343
УДК 577.152.2
Прочное связывание нуклеотидов сопрягающим фактором хлоропластов CFI дефицитным по δ- и ε-субъединицам
Поступила в редакцию 20.07.1995
После доработки 18.10.1995
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: сопрягающий фактор хлоропластов, нуклеотидный обмен, гидролиз АТР.
Аннотация
После выделения, очистки и удалений δ- и ε-субъединиц сопрягающий фактор хлоропластов CFI удерживает 1 моль ADP и около 0,5 молей магния на моль фермента. Прочно связанный ADP обменивается со свободными [14С]АТР и [14С] ADP. Центр прочного связывания нуклеотидов катализирует гидролиз [14С]АТР. Определены кинетические параметры взаимодействия [14С]АТР и [14C]ADP с CFI-δε при субстехиометрических соотношениях нуклеотидов к ферменту в реaкции обмена между свободными и прочно связанными нуклеотидами и реакции гидролиза [14С]АТР. Показано, что константа скорости связывания ADP при pH 8,0 в 15 раз превышает соответствующую константу для AТР, тогда как различия в константах диссоциации этих нуклеотидов сравнительно невелики. На основе сопоставления скорости диссоциации ADP с прочно связывающего нуклеотиды центра и скорости гидролиза AТР в условиях избытка субстрата сделан вывод, что дефицитный по δ- и ε-субъединицам фермент сохраняет функциональную гетерогенность каталитических центров.