БИОХИМИЯ, 1996, том 61, вып. 1, с. 73–81
УДК 577.352.5
Mg2+, ATP-зависимый транспорт Cа2+ в эндоплазматическом ретикулуме клеток миометрия
Поступила в редакцию 22.05.1995
После доработки 30.08.1995
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эндоплазматический ретикулум, гладкомышечные клетки, миометрий, транспорт Са 2+, кальциевый насос, Са2+ -преципитирующие анионы, тапсигаргин, циклопиазониевая кислота.
Аннотация
Проведено комплексное исследование влияния Са2+-преципитирующих анионов (оксалат, фосфат), кальциевого ионофора А23187 и высокоэффективных селективных ингибиторов кальциевого насоса эндо(сарко) плазматического ретикулума (тапсигаргин, циклопиазониевая кислота) на нечувствительную к действию рутениевого красного Mg2+,AТР-зависимую аккумуляцию Са2+ и пермеабилизированных дигитонином клетках миометрия небеременных эстрогенизированных крыс. Оксалат и фосфат стимулировали Mg2+,ATP-зависимую аккумуляцию Са2+ в пермеабилизированных гладкомышечных клетках. Кальциевый ионофор А23187 (5 мкМ), внесенный в среду инкубации, содержащую оксалат (10 мМ) или фосфат (20 мМ), предотвращал энергозависимое накопление Са2+. Тапсигаргин (50 нМ) и циклопиазониевая кислота (10 мкМ) полностью подавляли Mg2+,ATP-зависимую аккумуляцию Са2+, регистрируемую в присутствии Са2+-преципитирующих анионов в среде инкубации. Результаты кинетического анализа указывают на то, что сродство тапсигаргина к энергозависимой Са2+-транспортирующей системе гораздо больше, чем сродство циклопиазониевой кислоты: значение кажущейся константы ингибирования Кi составляет 0,9 нМ и 0,6 мкМ соответственно. Оксалат (10 мМ), введенный в среду инкубации, изначально содержащую тапсигаргин (50 нМ), не индуцировал Mg2+,АТР-зависимое накопление Са2+ в пермеабилизированных миоцитах. Полученные данные являются биохимическим доказательством существования в клетках миометрия кальциевого насоса, обеспечивающего Mg2+,АТР-зависимую аккумуляцию Са2+ в немитохондриальном кальциевом депо – эндоплазматическом ретикулуме. Этот процесс стимулируют проникающие анионы и подавляют селективные ингибиторы.