БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 12, с. 1900–1909
Исследование вращательной подвижности мембраносвязанной Na,K-ATPазы
Поступила в редакцию 30.06.1994
Аннотация
С помощью метода анизотропии фосфоресценции с высоким временным разрешением измерена вращательная подвижность E1 и E2 конформеров Na,K-ATPaзы солевых желез утки, меченной эозин-5′-изотиоцианатом (ЕITС). Для каждого конформера было найдено два типа подвижности. Более быстрая компонента, время вращательной корреляции которой при 20° составляла около 15 мкс для обоих конформеров фермента, на основе расчетов кажущегося радиуса вращения отождествлена с вращением (αβ)-протомера. Медленная компонента, время вращательной корреляции которой составляет для обоих конформеров 100-500 мкс – в зависимости от условий, по-видимому, соответствует наличию в мембране ассоциатов, образованных при взаимодействии протомеров Nа, К-АТРазы друг с другом или с другими белками. Повышение температуры вызывает уменьшение вклада быстрой и увеличение вклада медленной компоненты в регистрируемую кривую анизотропии фосфоресценции, что можно объяснить ассоциацией протомеров в более крупные олигомерные ансамбли. Величина олигомеров зависит от температуры и pH, и в наиболее благоприятных условиях может соответствовать размерам октамера.