БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 12, с. 1864–1871
Равновесные и кинетические параметры взаимодействия пероксидазы и ее конъюгатов со специфическими антителами в растворе
Поступила в редакцию 29.03.1994
Аннотация
Взаимодействие пероксидазы (ПХ) и ее конъюгатов с IgG (ПХ-IgG) и кортизолом (ПХ-КОР) и поливалентных антител против ПХ (АнтиПХ) изучено методом гомогенного иммуноферментного анализа. Определили суммарную каталитическую активность в реакции пероксидазного окисления орто-фенилендиамина свободной пероксидазой и ее конъюгатами и образующимися во времени иммунокомплексами пероксидазы и ее конъюгатов с антителами, специфичными к ферменту (АнтиПХ). Линеаризация зависимостей начальных скоростей пероксидазного процесса в координатах in(v – voo) – время, [AнтиПХ]/(v – voo) – [AнтиПХ]о и 1/( [AнтиПХ]оk1| + k=1) = [AнтиПХ]о, где v и voo -скорости реакции в определенный момент времени и после достижения равновесной концентрации иммунокомплексов, дали возможность определить константы диссоциации иммунокомплексов Кd и константы скорости образования и диссоциации этих комплексов, k1 и k-1. Значения Кd хорошо согласуются с определенными классическим методом Скэтчарда.