БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 11, с. 1730–1738
Новые сайт-специфические эндонуклеаза и метилаза из термофильного штамма Bacillus species КТ6
Поступила в редакцию 01.06.1994
Аннотация
Из термофильного штамма В. species КТ6 гель-фильтрацией на сефадексе G100 и последующими хроматографиями на гепарин-сефарозе и оксиапатите очищены до функционально чистого состояния сайт-специфическая эндонуклеаза R.BspKT6I и парная ей сайт-специфическая метилаза M.BspKT6I. Эндонуклеаза BsKT6I является изомером, но не изошизомeром эндонуклеаз Sau3AI и МbоI. Она «узнает» на молекуле ДHК последовательность GAT↓с и расщепляет ее, как указано стрелкой, в отличие от Sau3AI и MboI с образованием выступающего 3′-динуклeотида. Расщепление сайта ингибируется dam-метилированием. Липкие концы, образующиеся при действии B s KT6I, идентичны и комплементарны концам, образующимся при действии эндонуклеазы PvuI. Выделенная из штамма В. species КT6 метилаза защищает ДНК от последующего расщепления эндонуклеазой B s КТ6I. Метилируемым основанием является аденин.