БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 11, с. 1714–1729
Новая сайт-специфическая эндонуклеаза-метилаза из термофильного штамма Bacillus species LU11
Поступила в редакцию 01.06.1994
Аннотация
Из термофильного штамма Bacillus species LU11 выделена и очищена до гомогенного состояния новая сайт-специфическая эндонуклеаза BspLU11III. Фермент узнает последовательность 5′-GGGAC-3′ на двухцепочечной ДНК и разрывает ее в двух местах на расстоянии 10 и 11 нуклеотидов с З’-конца последовательности 5′-GGGAC-3′ и на расстояниях 14 и 15 нуклеотидов от узнаваемого сайта по комплементарной нити. Фермент находится в растворе в виде мономера с молекулярной массой ~ 93 кДа. В присутствии S-аденозил-метионипа фермент проявляет метилазную активность. Метилируется адениновое основание внутри сайта узнавания 5′-GGGAC-3′ по одной из цепей ДНК. Рестриктазная активность B sL u 11 III не зависит от АТР и стимулируется S-аденозил-метионином в концентрации 80 мкМ. Для проявления рестриктазной активности необходимы ионы магния. В присутствии ионов хлора наблюдается штриховая активность. BspLU11III не относится ни к одному из трех известных классов эндонуклеаз, но близок но свойствам к сайт-специфическим эндонуклеазам IV типа.