БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 11, с. 1675–1688
Просегмент дрожжевого « фактора направляет гетерологичный белок (гормон роста человека) в культуральную среду Saccharomyces cerevisiae
Поступила в редакцию 25.04.1994
Аннотация
Исследована роль просегмента дрожжевого феромона – α-фактора – в экспорте гетерологичного белка – гормона роста человека (ГР) – в культуральную среду дрожжей Saccharomyces cerevisiae. С помощью соответствующих генноинженерных конструкций показано, что различные N-концевые сигнальные пептиды (СП) сами по себе не способны обеспечить экспорт ГР. Клетки трансформанта, несущие плазмиду с гибридной последовательностью, кодирующей просегмент-ГР (без СП), накапливают негликозилированный предшественник в цитозоле. Только сочетание СП и просегмента в качестве N-концевого фрагмента – предшественника ГР – приводит к процессингу и экспорту зрелой формы гормона. Происхождение (или тип) СП при этом не имеет значения. Ингибиторы гликозилирования (2-дезокси-D-глюкоза и туникамицин) подавляют экспорт, но не нарушают поступления ГР в периплазму, из чего следует критическое значение интактности полиманиозидных цепей просегмента α-фактора для эффективного экспорта гетерологичного белка. На основании полученных результатов можно сделать вывод о том, что роли каждой из двух частей прспросегмента α-фактора различны. СП в составе препросегмента-ГР (препро-ГР) вводит просегмент-ГР в общий секреторный поток, тогда как просегмент после отщепления СП направляет ГР из клетки в культуральную среду.