БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 10, с. 1560–1573
Анса-анализ. V. вторичная специфичность пептидаз к структуре детектируемых групп аминонафталинсульфамидных хромогенных субстратов
Поступила в редакцию 01.03.1994
Аннотация
Рассмотрены возможности идентификации индивидуальных ферментов и препаратов, содержащих несколько протеаз, по их вторичной субстратной специфичности при гидролизе эквимолярной смеси конкурирующих хромогенных субстратов, различающихся только детектируемыми хромофорными группами. Показано, что различия в наблюдаемых скоростях гидролиза отдельных субстратов в смесях общей формулы Аn-АНСА-Х (А – остаток пептида или аминокислоты, АНСА – хромофорная группа, аминонафталинсульфамид, X – модификатор – алифатический заместитель в сульфонамидной группе) существенны, даже если субстраты идентичны по пептидной и хромофорной частям и различаются только модификаторами – у всех субстратов в смеси фрагменты X разные. На примере аргинильных производных АНСА показано, что смеси таких субстратов дают информативные АНСА-спектры, пригодные для идентификации аминопептидаз. Показано наличие аргиниламинопептидазной активности в яде змей и возможность идентификации ядов по АНСА-спектрам этой активности. Исследованы корреляции между строением модификаторов и эффективностью гидролиза субстратов. С их учетом предложен метод отбора субстратов дли включения и смесь.