БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 9, с. 1406–1413
Кинетика поодиночного протеолиза. протеолиз яичного альбумина
Поступила в редакцию 22.04.1994
Аннотация
Кинетику поодиночного протеолиза яичного альбумина пепсином, папаином и термитазой определяли по количеству непрогидролизованного белка. Найдено, что она описывается уравнением реакции первого порядка. Протекающий параллельно последовательный гидролиз не влияет на этот результат, так как он приводит только к расщеплению яичного альбумина на крупные фрагменты и не сопровождается образованием растворимых в ТХУ пептидов. Поодиночный протеолиз завершается после распада белка на не осаждаемые ТХУ пептиды, последующий гидролиз которых протекает с замедлением. Подчинение кинетике псевдопервого порядка не может быть обусловлено предшествующей протеолизу обратимой денатурацией либо локальным конформационным переходом. Скорость поодиночного протеолиза лимитируется скоростью расщепления одной-первой-пептидной связи в молекуле белка и его ход может быть описан интегральной формой уравнения Михаэлиса-Ментен. Определены условия (значения [So]/Km), при которых последнее практически линейно. Очевидно, концентрация конформеров белка-субстрата, доступная действию протеолитических ферментов, удовлетворяет этим условиям.