БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 9, с. 1385–1392
Валин : пируват-аминотрансфераза Brevibacterium flavum: каталитические свойства
Поступила в редакцию 04.04.1994
Аннотация
Изучены свойства валин : пируват-аминотрансферазы В. flavum АТСС 14067. Фермент подчиняется механизму би-би пинг-понг. Кт для L-аланина равна 1,53 мМ, L-валина – 0,52 мМ, пирувата – 0,41 мМ, 2-кетоизовалериата – 0,23 мМ. Константа равновесия для реакции L-аланип + 2-кетоизовалериановая кислота <—> L-валин + пируват равна 0,5. L-Изолейцин и L-циклосерин ингибируют аминотрансферазу конкурентно к L-аланину с Кi равной 3 мМ и 3 мкМ соответственно, и бесконкурентно к 2-кетоизовалериату. Фермент не требует ионов металлов для проявления каталитической активности. Ионы Fe3+, Cu2+, Zn2+ и Cd2+ ингибируют валин : пируват-аминотрансферазу. Фермент наиболее стабилен при pH 6,0. Аминотрансфераза содержит функционально значимые тиоловые группы. Анионы SО42, глицерин и пиридоксальфоcфат защищают фермент от термоинактивации. 2-Кетоизовалериат защищает валин : пируват-аминотрансферазу от инактивирующего воздействия 5,5′-дитиобис-(2-нитробензойной) кислоты и n-хлормеркурибензоата. Ни один из субстратов не оказывает заметного термостабилизирующего действия.