БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 9, с. 1320–1329
Выделение, очистка и некоторые свойства цитрат-синтазы дрожжей Yarrowia (candida) lipolytica — продуцентов лимонной кислоты
Поступила в редакцию 08.02.1994
Аннотация
Цитрат-синтаза (цитрат-оксалоацетат-лиаза (СоА-ацетилирующая), КФ 4.1.3.7) – ключевой фермент цикла трикарбоновых кислот – выделена и очищена до гомогенного состояния из цитрат-продуцирующих дрожжей Y. lipolytica. Очистка фермента состоит из трех стадий: высаливания, гидрофобной и ионообменной хроматографии. В результате подобной процедуры очистки получен препарат фермента с удельной активностью более 160 мкмоль/мин на 1 мг белка. Исследованы некоторые свойства цитрат-синтазы. Фермент имеет молекулярную массу порядка 70 кДа и состоит из двух идентичных субъединиц с молекулярной массой порядка 40 кДа. Km для ацетил-СоA составляет 10 мкмоль, для оксалоацетата – 5 мкмоль. Изучено влияние на цитрат-синтазную реакцию некоторых интермедиатов цикла трикарбоновых кислот, нуклеотидов и ионов металлов.