БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 7, с. 1020–1026
Гелевая модель функционирования люциферазы в клетке
Поступила в редакцию 16.02.1994
Аннотация
На основе иммобилизованных в крахмальном геле бактериальных NADH:FMN-оксидоредуктазы и люциферазы создана гелевая модель функционирования люциферазы в клетке. Показано, что характеристики иммобилизованной люциферазы зависят от времени высушивания, количества и концентрации геля, природы подложки при высушивании и характеристик исходного препарата люциферазы. В полученном иммобилизованном препарате сохраняются функционально важные группы ферментов и высокая специфичность люциферазы по отношению к альдегидам. Оптимальное микроокружение фермента в геле приводит к сохранению высокой активности препарата и увеличению его стабильности. Найдены условия многократного использования препарата. Данный метод обеспечивает совместную иммобилизацию с люциферазой других ферментов и их субстратов. Ошибка измерений биолюминесценции для дисков – 5-10%. Найдены режимы стабилизации иммобилизованной люциферазы при многократном использовании.