БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 3, с. 449–456
Высокостабильная Ca,Mg-зaвиcимaя ДНКаза из гепатопанкреаса краба
Поступила в редакцию 03.08.1993
Аннотация
Исследовано влияние различных денатурирующих факторов на стабильность Са,Mg-зависимой ДНКазы из гепатопанкреаса краба Paralithodes camtschatlca. Показано, что ДНКаза устойчива к тепловой денатурации, время полуинактивации при 100° – 10 мин, температурный оптимум 70°. Фермент сохраняет активность в нейтральной и щелочной средах, но быстро инактивируется при pH<6. Показана устойчивость фермента к действию некоторых денатурирующих реагентов. Активность ДНКазы уменьшается в 2 раза в присутствии 1 М мочевины, 30%-ного этанола, 0,5%-ного дезоксихолата натрия и тритона Х-100, 0,1 %-ного Ds-Na. Дитиотреитол и 2-меркаптоэтанол в концентрации 0,8% не оказывают заметного влияния на активность фермента. Методом Эллмана показано, что белок содержит 36 остатков полуцистина. Отсутствие в молекуле фермента свободных SH-rpyпп предполагает наличие 18 дисульфидных связей. Определен аминокислотный состав фермента.