БИОХИМИЯ, 1994, том 59, вып. 1, с. 55–61
Выделение, очистка и кинетические свойства глутаминсинтетазы со средней степенью аденилирования из Azospirillum brasilense sp. 245
Поступила в редакцию 21.04.1993
Аннотация
Глутаминсинтетаза ассоциативного азотфиксирующего микроорганизма Azospirillum brasilense sp. 245 очищена по методике, включающей обработку ДНКазой I и стрептомицинсульфатом, фракционирование сульфатом аммония, термообработку, хроматографию на ДЭАЭ-Toyopearl 650М и высокоэффективную хроматографию на колонке Mono Q. Фермент электрофоретически гомогенен и имеет среднюю степень аденилирования (п- 6,4). Значения рН-оптимумов биосинтетической реакции в присутствии двух активирующих ионов – Мn2+ и Mg2+ – равны 6,25 и 8,0 соответственно. Кинетическое поведение глутаминсинтетазы азоспириллы со средней степенью аденилирования в присутствии Mg2+ не описывается уравнением Михаэлиса-Ментен из-за ингибирования избытками обоих субстратов – аммония и глутамата. Величины Кт для аммония и глутамата соответственно равны 0,2 и 2,3 мМ,