БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 12, с. 1965–1976
Взаимоотношение двух форм ДНК-полимеразы α из икры костистой рыбы Misgurnus fossilis L. (вьюн).
Поступила в редакцию 19.04.1993
Аннотация
Из икры костистой рыбы Misgurnus fossilis (вьюн) выделены две формы ДНК-полимеразы α, α1 и α2, которые имеют близкие молекулярные массы (~170 кДа), но различаются по сродству к ионообменнику DEAE-Toyopearl. Обе формы ДНК-полимеразы α не обладают праймазной и 3′ → 5′-экзонуклеазной активностью. Доминирующая в яйцеклетках и ранних эмбрионах форма α2 получена в высокоочищенном виде. Она представлена полипептидом с молекулярной массой 168 кДа, который является, очевидно, каталитической субъединицей ДНК-полимеразы α. На основе изменения активности двух форм ДНК-полимеразы α в эмбриогенезе высказано предположение, что форма α1 является продуктом пост-трансляционной модификации исходной формы α2. Чтобы проверить, это предположение, форма α2 подвергнута обработке разными ферментами, включая протеинкиназу С, щелочную фосфатазу и различные протеазы (трипсин, амипопептидаза, карбоксипептидазы А и В). Проведенные опыты показали, что форма фермента со свойствами α1 может быть получена из исходной формы α2 в результате ограниченного протеолиза под действием карбоксипептидаз A и B. Таким образом, вероятным механизмом посттрансляционной модификации ДНК-полимеразы α в яйцеклетках и эмбрионах вьюна является структурная перестройка фермента в результате ограниченного протеолиза каталитической субъединицы с карбоксильного конца.