БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 12, с. 1886–1892
Эффективный одноэтапный метод получения эластазы и катепсина G из лейкоцитов человека.
Поступила в редакцию 20.01.1993
Аннотация
Описан метод быстрого одностадийного получения высокоочищенных препаратов эластазы и катепсина G из лейкоцитов человека с использованием биоспецифической хроматографии на гордокс-сефарозе. Электрофорез в градиентном (10-15%) полиакриламидном геле в присутствии DS-Na выявил три изоформы эластазы с молекулярными массами 26,3, 27,8 и 28,9 кДа. Для катепсина G выявлена одна белковая зона с подвижностью 27 кДа. Оптимум рН для эластазы составил 7,0-7,5, а для катепсина G — 7,5-8,0. Полученные препараты эластазы характеризовались величиной удельной активности, измеренной по гидролизу n-нитрофенилового эфира третичного бутокси-L-аланина, 3-8 мкмоль/мин на мг белка; препараты катепсина G имели удельную активность 20-40 мкмоль/мин на 1 мг белка по гидролизу этилового эфира бензоил-тирозина.