БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 9, с. 1445–1453
Эластаза из гепатопанкреаса камчатского краба.
Поступила в редакцию 03.11.1992
Аннотация
С помощью ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-сефарозе и гель фильтрации на сефакриле S-200 выделен гомогенный препарат эластазы из гепатопанкреаса краба Paralithodes camtschatica с удельной активностью, определенной по Вос-(Ala)3-pNA, равной 3,7 ед. на 1 мг белка. Молекулярная масса и изоэлектрическая точка эластазы краба равны 28,5 кДа и 4,5 соответственно. Определен аминокислотный состав выделенной протеазы. Изучение каталитических свойств эластазы краба показало, что максимальная активность этого фермента проявляется при pH 8-8,5, причем Кт и kкат, измеренные по отношению к Suc-(Ala)3-pNA, равны 4 мМ и 3 с-1 соответственно. Найдено, что эластиналь и диизопропилфторфосфат в отличие от N-этилмалеимида, 2-меркаптоэтанола, η-хлормеркурибензоата, ЭДТА, о-фенантролина полностью подавляют активность выделенной протеазы, что позволяет отнести ее к классу сериновых эластаз. Обнаружен активирующий эффект для эластазы краба в присутствии неорганических солей. Эластаза довольно стабильна в нейтральных и щелочных растворах, в присутствии детергентов и при температурах ниже 45° (pH 8,0).