БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 9, с. 1341–1350
Существенные остатки тирозина транскетолазы пекарских дрожжей. II. Исследование функции существенных остатков тирозина.
Поступила в редакцию 15.04.1993
Аннотация
С помощью метода химической модификации исследовали функции существенных остатков тирозина транскетолазы пекарских дрожжей, наличие которых в структуре фермента установлено ранее. В ходе модификации фермента по остаткам тирозина скорость расщепления больших (пяти- и шестиуглеродных) субстратов падает быстрее, чем скорость расщепления малых (трехуглеродных) субстратов. Большие субстраты способны защищать фермент от инактивации, а малые стимулируют ее. Число существенных для активности с малыми кетосахарами остатков тирозина равно одному на активный центр, а для активности с большими субстратами необходимы по крайней мере два остатка тирозина на мономер. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что один из существенных остатков тирозина необходим для каталитического превращения любых субстратов-доноров. Еще как минимум один остаток тирозина обеспечивает каталитически правильный способ связывания в активном центре фермента лишь больших кетосахаров, но не требуется для связывания и расщепления малых. В ходе модификации фермента выявлена неэквивалентность его активных центров в связывании субстрата.