БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 7, с. 1085–1093
Исследование взаимодействия ДНК-праймаз из тимуса тлеленка и плаценты человека с олигонуклеотидными матрицами различной длины и структуры.
Поступила в редакцию 29.09.1992
Аннотация
Показано, что значение константы Михаэлиса в реакции синтеза олигорибонуклеотидных праймеров на роlу(dТ)-матрице, катализируемого ДНК-праймазами из тимуса теленка и плаценты человека, возрастает линейно с увеличением длины матрицы вплоть до 10 нуклеотидных звеньев и далее не меняется, что может указывать на то, что с активным центром фермента эффективно контактируют 10 звеньев олигонуклеотидной матрицы. Предполагается, что это фактор, определяющий длину рибопраймеров, d(pT)2 – минимальная матрица для синтеза рибопраймеров. Для синтеза праймеров, по-видимому, не важна сохранность углеводно-фосфатного остова матрицы. Олигорибоаденилатные праймеры длиной до 10 нуклеотидных звеньев синтезируются процессивно. Накопление в качестве продуктов ди- и тринуклеотидов вызвано диссоциацией коротких праймеров из комплекса фермента с матрицей. На основании совокупности данных обсуждается возможный механизм катализируемого ДНК-праймерами синтеза рибопраймеров, а также «переключение» с праймазной активности на полимеразную.