БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 6, с. 962–966
Аффинная модификация белков, связывающих нуклеиновые кислоты в клетках млекопитающих, алкилирующими производными олигонуклеотидов.
Поступила в редакцию 07.07.1992
Аннотация
С использованием алкилирующего производного олигонуклеотида (pT)16, меченного 32P, изучали специфичность взаимодействия олигонуклеотидов с клетками млекопитающих. В большинстве исследованных клеточных линий фибробластоидного происхождения ( COS-1, vero, L-671, Ag 17-1, СНО, В7) и в гепатоцитах мыши выявлены белки, специфично взаимодействующие с олигонуклеотидами. В клетках Ag 17-1 и COS-1 кроме белка с молекулярной массой – 79 кДа, характерного для всех исследованных в работе фибробластных линий, выявлен добавочный белок с молекулярной массой -83 кДа. В гепатоцитах мыши (BALB/c) белок с такой молекулярной массой является главным олигонуклеотидсвязывающим белком. На основании концентрационных зависимостей специфической модификации белков-рецепторов для гепатоцитов определено значение констант связывания олигонуклеотидных производных с белком. Для алкилирующего производного олигонуклеотида рТ16 и такого же производного фосфотиоатного олигонуклеотида эта величина оказалась равна 5-106М-1.