БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 6, с. 913–920
Ренатурация бактериальных металлопротеиназ.
Поступила в редакцию 16.06.1992
Аннотация
Бактериальные металлопротеиназы, секретируемые Bacillus tliermoproteolyticus и Bacillus megaterium, денатурированные обработкой фенолом или кислым этанолом, могут быть ренатурированы путем растворения в 99,7%-ной муравьиной кислоте с последующим разбавлением этого раствора и его нейтрализацией рассчитанным количеством щелочи. Ренатурация происходит наилучшим образом при pH 9 в присутствии 30% глицерина, являющегося стабилизатором, ионов кальция и цинка, необходимых для формирования нативной структуры и воссоздания каталитического центра ферментов. Выход активных ферментов составляет 60-80%. Реактивированные металлопротеиназы сохраняют свои ферментативные свойства, аминокислотный состав и молекулярную массу. В предложенных условиях автолиз металлопротеиназ не сказывается существенным образом на процессе ренатурации.