БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 6, с. 879–890
Влияние гликопротеидов на олигомерную структуру и каталитическую активность α-L-фукозидазы почек человека.
Поступила в редакцию 09.06.1992
Аннотация
α-L-Фукозидаза (К.Ф.3.2.1.51) из почек человека была выделена и очищена до гомогенного состояния с помощью аффинной хроматографии на конканавалин-α-сефарозе и фукозиламиносефарозе. Каталитическая активность и олигомерная организация фермента были исследованы в системе обращенных мицелл аэрозоля ОТ в октане. Обнаружено, что в мицеллярных системах в зависимости от степени гидратации – параметра, определяющего геометрические размеры внутренней водной полости мицелл, – фукозидаза может быть организована в виде 53 кДа мономеров, 110 кДа димеров, 230 кДа тетрамеров и 480 кДа октамеров. Ассоциация мономеров в тетрамер или октамер приводит к увеличению удельной каталитической активности фермента в 3-4 раза. При значениях pH и ионной силы, соответствующих значениях внутри лизосом клетки, α-L-фукозидаза выделяется из ткани исключительно в форме тетрамера. Обработка тетрамера фукозидазы холатом натрия с последующим диализом приводит к необратимой диссоциации фермента на мономеры. Диссоциация фукозидазы сопровождается снижением ее удельной каталитической активности в 2—3 раза. Тетрамерная организация и уровень удельной каталитической активности фермента могут быть восстановлены в системе обращенных мицелл в присутствии гликолипидов: ди- и тригексозилцерамидов, GM1-ганглиозида, а также смеси ганглиозидов из мозга быка.