БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 6, с. 857–865
Субстратная специфичность Т4 РНК-лигазы: роль пуринового основания нуклеотида в образовании ковалентного АМР-РНК-лигазного комплекса.
Поступила в редакцию 01.06.1992
Аннотация
Нуклеотиды связывающий центр Т4 РНК-лигазы (КФ 6.5.1.3) исследован с помощью ряда аналогов ATP, модифицированных в пуриновой части молекулы ATP в положениях 1, 2, 6 и 8: оксо-АТР (I), 6-хлор-пур (II), 6-меркапто-пур (III), этено-АТР (IV), 8-сульфо-АТР (V), 8-бромо-АТР (VI), IPT (VII), GTP (VIII). Показан обратимый характер ингибирования фермента указанными соединениями. Установлены кинетические параметры конкурентного ингибирования (I50, Кi) для I—VIII. Показано, что V, VI и VII проявляют слабые субстратные свойства в реакции аденилирования Т4 РНК-лигазы. Выявлена важность 1- и 6-ого положений в молекуле субстрата ATP для осуществления связывания с активным центром фермента.