БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 5, с. 759–771
Моноклональные антитела к ферритину селезенки человека. II. Локализация эпитопов и количественные параметры связывания антигена.
Поступила в редакцию 07.05.1992
Аннотация
Исследовано взаимодействие трех моноклональных антител с ферритином селезенки человека. Титрованием растворов моноклональных антител иммобилизованным антигеном определено удельное содержание активных антигенспецифичных антител в асцитных жидкостях (22-37%), во фракции суммарного IgG (35-50%) и в аффинном элюате антитела HSF102 (88%). С использованием [125I] ферритина и предложенной нами математической модели определены константы аффинности моноклональных антител, лежащие в диапазоне 6⋅10^8 — 3⋅10^9 М-1. Каждое из трех моноклональных антител в значительной степени (на 77-95%) ингибирует связывание поликлональных кроличьих антител с ферритином, что предполагает компактное расположение иммунодоминантных эпитопов в виде кластеров со сближенными центрами связывания моно- и поликлональных антител. Анализ конкуренции и аддитивного связывания моноклональных антител показал, что эпитоп антитела HSF102 локализован на периферии кластера и отделен от эпитопов антител HSF101 и FISF103 расстоянием, позволяющим неконкурентное связывание двух антител. Конкуренция антител HSF101 и HSF103 указывает на перекрывание их эпитопов. Показано, что максимальное число молекул [125I] IgG, способных одновременно связаться с одной молекулой ферритина, равно четырем и характеризует максимальную валентность этого антигена в реакции с антителами класса IgG.