БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 5, с. 681–691
Выделение и исследование свойств Ca,Mg-зависимой эндонуклеазы из гепатопанкреаса краба Paralithodes camtschatica
Поступила в редакцию 18.10.1991
Аннотация
Разработана схема выделения Ca,Mg-зависимой ДНКазы из гепатопанкреаса краба, включающая хроматографии на ДЭАЭ-Toyopearl, оксиапатите, Mono Q и суперозе-12 (FPLC). Молекулярная масса гомогенного препарата ДНКазы, определенная методом электрофореза в денатурирующих условиях, равна 42 кДа, изоэлектрическая точка 4,0. Активность фермента в присутствии разных ионов убывает в ряду (Ca2+ + Mg2+) > (Mg2+ + ЭГТА) ≥ (Ca2+ + Mn2+) = Mn2+ > Co2+ > Ca2+, оптимум pH равен 7,5. В среде, содержащей только ионы Ba2+, Sr2+ и Zn2+, нуклеаза неактивна. Сульфгидрильные реагенты и G-актин не влияют на активность ДНКазы. Фермент является эндонуклеазой, гидролизующей двухцепочечную ДНК с образованием 5′-фосфат-концевых олигонуклеотидов.