БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 4, с. 529–540
Очистка и физико-химические свойства ферментов внеклеточного ксиланолитического комплекса гриба Aspergillus japonicus.
Поступила в редакцию 19.12.1991
Аннотация
Гриб A. japonicus секретирует в культуральную среду четыре ксиланазы: 1а, 1б, 1в и 2. Процентное соотношение внеклеточных ксиланаз 1а, 1б, 1в и 2 составляет соответственно 13,7, 56,2, 6,1 и 24,0% от общей активности ксиланолитического комплекса. Схема очистки ксиланазы 1б включала осаждение сульфатом аммония, гель-фильтрацию через сефадекс G-75 и хроматографию на DEAE-тойоперл 650М. Очистку ксиланаз 1а, 1в и 2 проводили по схеме, включающей осаждение сульфатом аммония, гель-фильтрацию через сефадекс G-25, хроматофокусирование на полибуфер-ионообменнике РВЕ-94 с последующим рехроматофокусированием. Степень очистки ксиланаз 1а, 1б, 1в и 2 составляла соответственно 61, 2840, 67, 200. По данным гель-фильтрации молекулярная масса ксиланазы 1а составляет 34 кДа, ксиланазы 1б – 87 кДа, ксиланазы 1в – 33 кДа и ксиланазы 2-32 кДа. Ксиланазы 1 (1а, 1б, 1в) являются кислыми белками с pI 4,1; 4,4; 4,7, а ксиланаза 2 – нейтральным белком с pI 7,2. Все ксиланазы с максимальной скоростью гидролизуют ксилан при pH 4,8-5,0. Ксиланаза 2 отличается от ксиланаз 1 (1а, 1б, 1в) более высоким температурным оптимумом действия на ксилан. Ксиланазы не являются металлоферментами. Активность ксиланаз сильно снижается при повышении ионной силы растворов. Все изученные ферменты наиболее стабильны при pH 7,0.