БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 4, с. 512–528
Теория контроля «неклассических» ферментных систем и методы изучения «туннелирования» метаболитов.
Поступила в редакцию 11.08.1992
Аннотация
Ассоциация ферментов в комплексы может приводить к изменению их каталитических свойств и, возможно, к прямому переносу интермедиатов без выхода их в раствор (туннелированию). В данной работе предложены методы анализа таких систем, использующие представления и результаты теории контроля метаболизма. Они основаны на измерении коэффициента отклика потока на изменение объема системы и на действие специфических ингибиторов ферментов, не влияющих на фермент-ферментные взаимодействия. С помощью изменения объема определяется сумма «истинных» коэффициентов управления, СJЕ (относительно концентрации ферментов), а с помощью ингибиторов – сумма так называемых кажущихся коэффициентов управления, appCjEi Сумма коэффициентов СJЕi может быть больше, меньше или равна единице в зависимости от кинетических свойств. отдельных процессов «неклассических» ферментных систем. В то же время, сумма коэффициентов aррСJЕi оказывается всегда большей или равной единице, причем если она больше единицы, это говорит о том, что в реакциях системы действительно имеет место туннелирование метаболитов. В системах in vitro, реконструированных из отдельных ферментов, действие специфических ингибиторов можно заменить химической (или полученной генетическими методами) модификацией рассматриваемых ферментов по активному центру.