БИОХИМИЯ, 1993, том 58, вып. 3, с. 438–455
Сигнал-проводящие и низкомолекулярные GTP-связывающие белки легких и эндотелия: локализация в мембранах и цитозоле, взаимодействие с F-актином.
Поступила в редакцию 16.03.1992
Аннотация
В легких и эндотелии млекопитающих с использованием [32Р] ADР-рибозилирования бактериальными ADP-рибозилтрансферазами, иммуно- и [α-32P]GTP- блоттингов были идентифицированы 41-(Gi1α), 40-(Gi2α), 41-(Gi3α), 40-и 45 кДа-формы Gsα, 36 кДа β1- и 35 кДа β2-субъединицы сигнал-проводящих GTP-связывающих белков (G-белков), а также 19—26 кДа низкомолекулярные GTP-связывающие белки (SMG-белки): Ras, Rho, Rас, G25K (Gp), ARF-белки и SMG-белки, связывающие с высоким сродством [α-32P]GTP. Данные G- и SMG-белки содержатся в разных соотношениях в мембранной и цитозольной фракциях исследуемой ткани (клеток). Выявлено, что Gi2α- и Gsα-субъединицы (но не β1-субъединица и SMG-белки) могут частично (~1%) высвобождаться из мембран в раствор под действием аналогов GTP (GTPγS или Gpp(NH)p) в присутствии ионов магния. Показано, что при экстракции буферным раствором низкой ионной силы в присутствии ЭДТА из мембран высвобождаются чувствительная к коклюшному токсину Gi2α- и β1-субъединицы. Установлено, что содержащиеся в цитозоле, функционально сопряженные в αβγ-гетеротример субъединицы Gi-белков (преимущественно Gi2α- и β1-субъединицы), а также SMG-белки, выявляемые [α-32Р]GТР-блоттингом, но не SMG-белки, чувствительные к ботулиническому С3-экзоферменту (rho/rac) или ARF, могут взаимодействовать с F-актином. Около 20% этих белков выявляется и в тритон X-100-нерастворимой (цитоскелетной) фракции эндотелия. Сделано предположение, что одной из причин, приводящих к формированию «полидисперсных» Структур G- и SMG-белков в клетке, может быть их взаимодействие с актиновыми филаментами.