БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 12, с. 1883–1891
Очистка и свойства пирокатехазы II из штамма Pseudomonas putida 87
Поступила в редакцию 12.02.1992
Аннотация
Обнаружена индукция ферментов модифицированного орто-пути (пирокатехазы II, мукопатциклоизомеразы II, диенлактонгидролазы и малеилацетатредуктазы) у штамма Pseudomonas putida 87 при использовании 3-хлорбензойной кислоты в качестве единственного источника углерода и энергии. Очищена пирокатехаза II — ключевой фермент расщепления хлорпирокатехинов. Молекулярная масса фермента, определенная методом гель-фильтрации, равнялась 65 000. Минимальная молекулярная масса, определенная методом DS-Na-электрофореза, составляла 33 000, pH Оптимум фермента находился в пределах значений pH 7,2-7,8, температурный оптимум составлял 35°. Наиболее стабильной при хранении пирокатехаза II была в 50 мМ трис-НСl-буфере, pH 7,8, при 4°. Относительные значения Vmax для пирокатехазы II с 3-хлор-, 4-хлор- и 3,5-дихлорпирокатехинами составили соответственно 28, 50 и 41% от уровня с пирокатехином. Сродство фермента к хлорпирокатехинам было в 3-9 раз выше, чем к метилпирокатехинам, и в 10-20 раз выше, чем к незамещенному пирокатехину.