БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 11, с. 1712–1719
Очистка и физико-химические свойства растворимой карбоксипептидазы и из серого вещества головного мозга кошки
Поступила в редакцию 10.02.1992
Аннотация
Карбоксипептидаза Н (КФ 3.4.17.10) из растворимой фракции серого вещества головного мозга кошки с использованием аффинной хроматографии на диасорб-L-аргинине и электрофореза в 7,5%-ном ПААГ выделена и очищена в 598 раз с выходом 16%. Фермент имеет Мr= 50 кДа, состоит из одной полипептидной цепи, проявляет максимальную активность при pH 5,6 и является тиолзависимым металлоферментом, содержащим в активном центре ион Zn2+. Km и V гидролиза дансил-Phe-Leu-Arg равны соответственно 100±5 мкМ и 12,5± 1,4 мкМ/мин на 1 мг белка. Обнаружено существование двух форм растворимой карбоксипептидазы Н, различающихся значениями изоэлектрических точек (pI) и оптимумами pH. Форма с pI 4,8 проявляет максимальную активность при pH 5,5-5,6, а форма с pI 5,25 – при pH 6,0.