БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 10, с. 1481–1490
Физико-химические свойства фотопротеина из гидроидного полипа Obelia longissima
Поступила в редакцию 16.09.1991
Аннотация
Из гидроидов вида Obelia longissima по схеме, включающей гель-фильтрацию на сефадексе G-75 (fine), ионообменную хроматографию на Полисил СА-300 (10 мкм), гидрофобную хроматографию на фенил-сефарозе CL-4B, гель-фильтрацию на сефакриле S-200 (superfine), ионообменную хроматографию на колонке Mono Q при pH 7,0, хроматофокусирование на колонке Mono Р (градиент pH 6,0-4,0), ионообменную хроматографию на колонке Mono Q при pH 5,5; 8,8; 7,0, выделен гомогенный (по данным электрофореза в присутствии DS-Na) фотопротеинобелин. Молекулярная масса белка в нативных условиях составляет 30 кДа, в присутствии DS-Na – 19,8 kDa. Удельная активность обелина равна 4,9⋅10^15 квант на 1 мг белка; константа псевдопервого порядка спада биолюминесценции – 4 с -1; квантовый выход — 0,16. Интервал измерения ионов кальция составляет 10^-7 – 10^-5 М. Для обелина характерен спектр люминесценции с максимумом при 469 нм, спектральный максимум флуоресценции разряженного фотопротеина находится при 455 нм. Оптимум pH люминесценции обелина приходится на интервал 9,0—10,5, Молекулярные константы ионизации имеют значения pK1 6,8 и рК2 12,2; константы ионизации для активного центра — pK1 9,1 и рК2 10,2 соответственно.