БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 8, с. 1271–1277
Конъюгаты тиреоидных гормонов с родамином Б как флуоресцентные лиганды транспортных белков плазмы крови человека
Поступила в редакцию 08.01.1992
Аннотация
Синтезированы конъюгаты тироксина (Т4) и трииодтиронина (Т3) с родамином Б, в которых молекулы гормона и флуоресцентного красителя соединены тиокарбамильной связью. Эти конъюгаты обладали способностью конкурентно ингибировать связывание [125 I]Т4 с тремя белковыми препаратами- Т4-связывающим глобулином (ТСГ), аполипопротеином А-1,(апоА-1) и липопротеидными частицами высокой плотности (апоА-1-ЛВП), выделенными из сыворотки крови человека аффинной хроматографией на Т4-сефарозе и подвергнутыми дополнительной очистке. Найдены следующие значения констант ассоциации: для производного Т4 – 3⋅10^7 М -1 (ТСГ), 4,1⋅10^5 М -1 (апоА-1) и 4,2⋅10^5 М- 1 (апоA-1-ЛBП); для производного Т3 – 1,6⋅10^7 М -1 (ТСГ), 5,1⋅10^5 М -1 (апоА-1) и 5,2⋅10^5 М -1 (апоА-1ЛВП). Связывание тиреоидных гормонов, меченных родамином Б, с ТСГ или апоА 1 практически не изменяло параметры абсорбции и флуоресценции родаминового хромофора. Взаимодействие конъюгатов с апоА-1-ЛВП вызывало существенное усиление интенсивности и голубой сдвиг на 3 нм максимума поглощения, а также увеличение в 1,5 раза амплитуды полосы флуоресценции при 586 нм. Биологические и флуоресцентные свойства изученных производных Т4 и Т3 позволяют говорить о возможности применения этих соединений в исследованиях транспорта тиреоидных гормонов различными связывающими белками плазмы в модельных биологических системах с использованием традиционных флуориметричсских методов.