БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 8, с. 1196–1205
Селективная солюбилизация и биохимический анализ белков внешней мембраны R. Prowazekii
Поступила в редакцию 28.11.1991
Аннотация
Изучалась солюбилизация белков тотальных мембран (смесь цитоплазматической и внешней мембраны) риккетсий Провачека, типичной грамотрицатольной бактерии, тремя различными детергентами. Показано, что изолированные наружные мембраны и саркозил-нерастворимый материал содержат основные полипептиды- 134, 31, 29,5 и 25 кДа, и минорные полипептиды 78, 69, 42 и 17 кДа, а тотальные мембраны – те же самые и множество дополнительных минорных белков. Материал; солюбилизируемый октилглюкозидом в присутствии MgCl2, содержит исключительно основные белки 134, 31, 29,5 и 25 кДа. Дифференциальная солюбилизация не имеет места при обработке мембран октилглюкозидом без Mg2+ или тритоном Х-100. Белки риккетсий нечувствительны к трипсину в составе целых клеток и тотальных мембран, если они предварительно не солюбилизированы октилглюкозидом. Протеиназа К гидролизует все белки тотальных мембран и только полипептид 134 кДа целых клеток. В иммуноблоттинге с реконвалеcцентной сывороткой человека реагируют преимущественно основные белки внешней мембраны 134/ 31 и 29,5 кДа, а также минорные белки 60, 42 и 17 кДа.