БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 7, с. 1021–1030
Очистка и свойства GTP-циклогидролазы Bacillus subtilis
Поступила в редакцию 12.07.1991
Аннотация
Из клеток Bacillus subtilis посредством фракционирования экстрактов сульфатом аммония и использования ионообменной и гидрофобной хроматографии получен высокоочищенный препарат GTP-циклогидролазы. Определены N-концевая аминокислотная последовательность и общий аминокислотный состав белка. По данным электрофореза* в присутствии DS-Na молекулярная масса фермента составляет 45 кДа. Активный фермент существует в нескольких формах, хорошо разделяющихся при нативном электрофорезе. Максимальная ферментативная активность обнаруживается при наличии в реакционной среде 1,5 мМ Мn2+, в присутствии ионов Mg2+ проявляется 70% ферментативной активности. Активность фермента ингибируется ионами тяжелых металлов, хелатирующими агентами и не проявляется в отсутствие тиолвосстанавливающих соединений. Фермент активен в широком диапазоне pH с максимумом при pH 8,2. Очищен и идентифицирован пиримидиновый продукт циклогидролазной реакции — 2,5-диамино-6-окси-4-рибозиламинопиримидин-5′-фосфат. В ходе реакции из GTP образуется также пирофосфат.