БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 6, с. 845–855
Субстратная специфичность фосфорибозил-аминоимидазол-сукцинокарбоксамид- синтетазы (САИКАР-синтетазы) дрожжей Saccharomyces cerevisiae
Поступила в редакцию 16.08.1991
Аннотация
Изучена субстратная специфичность фосфорибозил-аминоимидазол-сукцинокарбоксамид-синтетазы (САИКАР-синтетазы) (КФ 6.3.2.6) дрожжей Saccharomyces cerevisiae в отношении набора аналогов карбоксиаминоимидазолриботида (КАИР) с модификациями в имидазольном кольце, в рибозном фрагменте и в фосфатной группе, а также аналогов аспарагиновой кислоты. Установлено, в частности, что 1) наличие дважды заряженной фосфатной группы, 2′- и 3′-гидроксильных групп в рибозном фрагменте и аминогруппы в имидазольном кольце молекулы КАИР не является строго обязательным условием для протекания реакции; 2)3-карбокси-1,2,4-триазольный аналог КАИР является конкурентным ингибитором фермента; 3) 2′-дезокси-КАИР является субстратом как дрожжевой САИКАР-синтетазы, так и фермента из печени птиц и эритроцитов человека. Предложена новая (с использованием 2′-дезокси-КАИР) методика определения активности САИКАР-синтетазы в случае бифункциональных ферментов, обладающих наряду с активностью САИКАР-синтетазы активностью фосфорибозил-аминоимидазол-карбоксилазы. Показано, что субстратами дрожжевой САИКАР-синтетазы являются некоторые аналоги аспарагиновой кислоты – L-яблочная кислота, β-threo-окси- и β-threo-фтор-аспарагиновые кислоты и аланозин. Обсуждается возможное участие малата в качестве альтернативного субстрата в САИКАР-синтетазной реакции in vivo. Приведены результаты сопоставления известных первичных структур САИКАР-синтетаз дрожжей, бактерий, человека и цыпленка.