БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 5, с. 758–766
Исследование структурно-функциональных особенностей изоферментов лактатдегидрогеназы с помощью антипептидных антител к М4-изоформе лактатдегидрогеназы свиньи
Поступила в редакцию 30.09.1991
Аннотация
Исследовали структурно-функциональные особенности изоферментов лактатдегидрогеназы (ЛДГ) человека, свиньи, кролика, крысы с помощью антипептидных антител (АТ) к M4-изоформе ЛДГ свиньи. Были использованы антипептидные АТ к N-концевому участку (аминокислотные остатки 1-32), гипервариабельному (40% гомологии) и фрагменту 180-214, высококонсервативному, содержащему гистидин активного центра фермента. Антипептидные АТ к фрагменту из активного центра М4-изофермента свиньи оказывали избирательное ингибирующее воздействие на каталитическую активность изоферментов ЛДГ разных биологических видов в отличие от антипептидных АТ к N-концевому участку, которые не оказывали влияния на активность изоферментов ЛДГ. Выявление специфического взаимодействия антипептидных АТ с различными изоформами ЛДГ позволило сделать вывод о том, что аминокислотные последовательности 1-32 и 180-214 являются иммунохимически идентичными только для М4-изоферментов ЛДГ человека и свиньи и что для принадлежности аминокислотной последовательности к общей антигенной детерминанте необходимо отсутствие в данной последовательности замен аминокислотных остатков, относящихся к существенным заменам. С помощью химической модификации М4-изофермента свиньи диэтилпирокарбонатом и получения АТ к модифицированному изоферменту показано, что гистидин-195, входящий в активный центр фермента, непосредственно не участвует в связывании с АТ.