БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 3, с. 348–361
Анализ колоколообразных pH-зависимостей скорости ферментативной реакции
Поступила в редакцию 28.10.1991
Аннотация
Предложены новые графические методы количественного анализа колоколообразных pH-зависимостей скорости ферментативной реакции; И использованной модели фермент рассматривается как двухосновная кислота НЕН. Предполагается, что протонированнаи форма фермента НЕН и двукратно ионизированная форма Е2- каталитически неактивны, а из двух однократно ионизированных форм фермента (НЕ- и ЕН-) каталитическую активность проявляет только одна из форм. Выражение для зависимости удельной ферментативной активности (α) от рH содержит три параметра: молекулярные константы диссоциации НЕН (K1 и K2) и удельную ферментативную активность однократно ионизированной формы фермента (α2). Для определения параметров α2, K1 и К2 на зависимости а от pH выбирают парные точки, расположенные на восходящей и нисходящей ветвях на постоянном уровне удельной ферментативной активности, или парные точки, абсциссы которых, различаются на постоянный множитель. Для иллюстрации применимости предложенных методов расчета параметров колоколообразных зависимостей ферментативной активности от pH использованы экспериментальные зависимости kcat/Km и kcat от pH для ряда ферментов. Проанализирован характер зависимости параметров α2, K1 и K2 от концентрации субстрата.