БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 2, с. 236–245
Выделение и свойства внутриклеточной пептидазы Brevibacterium
Поступила в редакцию 28.05.1991
Аннотация
Внутриклеточная пептидаза Brevibacterium Е 531 – продуцента лизина, была очищена в 6500 раз хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе, аффинном сорбенте H-Thr(But)-Phe-Pro-гексаметилендиамин-сефарозе 4В и гель-фильтрацией на сефадексе G–200. Фермент проявляет максимальную активность при pH 7,7-7,9 по n-нитроанилиду пролина и легко отщепляет глицин, аланин и пролин от ди-, три- и тетрапептидов, практически не расщепляя олигопептиды большей длины. Он не ингибируется комплексонами — ЭДТА, 8-оксихинолином и 1,10-фенантролином. Пептидаза не активируется ионами двухвалентных металлов, а ионы Zn2+, Cd2+, Hg2+ и Cu2+ подавляют ее активность. Гель-фильтрация фермента через сефадекс G-200 указывает на то, что его молекулярная масса не менее 250 кДа. В присутствии DS-Na молекулярная масса фермента равна 43 кДа, что говорит о наличии у него четвертичной структуры. Особенностью пептидазы является ее активация галогенидами щелочных металлов и нитратом натрия, достигающая максимума при 0,05—0,1 М концентрации солей.