БИОХИМИЯ, 1992, том 57, вып. 1, с. 27–39
Выделение и свойства трех форм фосфорилазы и киназы фосфорилазы из скелетных мышц человека
Поступила в редакцию 28.03.1991
Аннотация
Из скелетных мышц человека получены три формы фосфорилазы (I, II и III), две из которых (I и II) активны в присутствии AMP, III-в его отсутствие. Величины pi фосфорилазы bI и bii одинаковы (5,8—5,9). При хроматофокусировании от фосфорилазы bii отделяется низкомолекулярный белок (20—21кДа) с pi 4.8. Отделение белка сопровождается сначала увеличением удельной активности фермента, а затем ее падением. При реконструкции комплекса активность фосфорилазы bii возвращается к исходному уровню. При фосфорилировании в фосфорилазу bii в ключается в 2 раза меньше 32Р, чем в фосфорилазу b кролика и bi человека. Можно полагать, что в молекуле фосфорилазы bii, выделенной из мышц человека, одна из двух субъединиц фосфорилирована in vivo. Показано, что эта форма фермента характеризуется большим сродством к гликогену и меньшей чувствительностью к аллостерическим эффекторам (АМР, глюкозо-6-фосфату, кофеину), чем фосфорилаза bi. Таким образом, из полученных форм фосфорилазы форма bii является необычной, поскольку она частично фосфорилируется киназой фосфорилазы и образует комплекс с низкомолекулярным белком, стабилизирующим ее активность. Из мышц человека выделен частично очищенный препарат киназы фосфорилазы. Для активности ферментане обходимы ионы Са2+ (с0,5=0,63 мкМ). При pH 6,8 фермент активируется кальмодулином (с0.5=15мкМ). Отношение активностей при pH6,8 и 8,2 равно 0,18.