БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 12, с. 2281–2296
Выделение, идентификация и свойства нового тироксинсвязывающего белка — аполипопротеина А-1 сыворотки крови человека.
Поступила в редакцию 07.05.1991
Аннотация
Из сыворотки крови человека аффинной хроматографией на тироксин (Т4)-сефарозе выделен белок с молекулярной массой ~25 кДа, который отличался по свойствам от известных Т4-связывающих белков. С помощью иммунодиффузии, радиоиммуноанализа, ультрацентрифугирования, определения липидного состава, избирательного осаждения и злектрофореза показано, что выделенный белок входит в состав липопротеидных частиц высокой плотности (ЛВП) и представляет собой аполипопротеин А-1 (апоА-1). Хроматография на холатсефарозе отделяла апоА-1 от липидного компонента и примесных белков и была эффективной при выделении апоА-1 непосредственно из сыворотки крови. Полученные аффинной хроматографией апо-А-1-ЛВП и апоА-1, а также выделенная ультрацентрифугированием по стандартной методике фракция ЛВП3 обладали Т4-связывающей активностью, причем их сродство к гормону характеризовалось величинами одного порядка. Взаимодействие Т4 с этими препаратами индуцировало сигналы разностного УФ-поглощения, меняло характеристики собственной флуоресценции апоА-1, но не влияло на круговой дихроизм системы гормон – белок. Связывание спин-меченого Т4 с апоА-1, апоА-1-ЛВИ и ЛВП3 приводило к существенному изменению формы спектра ЭПР и увеличению эффективного времени вращательной корреляции. Подвижность радикального фрагмента спин-меченого Т4 зависела от состава и свойств белкового препарата. На основании данных электронной спектроскопии можно предположить, что взаимодействие Т4 с, ЛВП протекает по особым механизмам, а молекулярные структуры образующихся комплексов не характерны для известных Т4-связывающих белков.