БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 11, с. 2032–2041
Внутриклеточное распределение и солюбилизация дрожжевой долихилпирофосфатазы
Поступила в редакцию 04.03.1991
Аннотация
Долихилпирофосфатаза дрожжей связана с мембранным аппаратом дрожжей. Фермент локализован преимущественно во фракции микросом и в вакуолях; кроме того, высокая удельная активность долихилпирофосфатазы была отмечена во фракции «легких мембран», флотировавших в градиенте фиколла при высоких скоростях центрифугирования. Долихилпирофосфатаза была солюбилизована из суммарной мембранной фракции дрожжей с помощью неионного детергента тритона Х-100 в присутствии 6 мМ MgCI2 и 18 мМ NaCl. Удельная активность солюбилизованного фермента более чем в 40 раз выше активности в исходном лизате протопластов. ЭДТА существенно (в 3 раза) активирует долихилпирофосфатазу, тогда как ортофосфат и большинство катионов двухвалентных металлов являются сильными ингибиторами. Солюбилизованный фермент может храниться без существенной потери активности в течение 6 месяцев при —10°.