БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 10, с. 1840–1849
Исследование пируватдегидрогеназного комплекса методом кругового дихроизма.
Поступила в редакцию 30.01.1991
Аннотация
Проведено сравнительное изучение спектра КД пируватдегидрогеназного комплекса и его пируватдегидрогеназного компонента (КФ 1.2.4.1). Показано, что спектральные свойства комплекса определяются таковыми пируватдегидрогеназного компонента: 1) спектр свободного от тиаминпирофосфата пируватдегидрогеназного комплекса повторяет основные характеристики апопируватдегидрогеназного компонента, 2) для обоих белков показано появление полосы комплекса с переносом заряда при насыщении тиаминпирофосфатом, 3) в обоих случаях полоса комплекса с переносом заряда исчезает при взаимодействии холоформы с пируватом и вновь появляется при введении в реакционную смесь дитиотреитола, использованного в качестве деацилирующего реагента. Добавленный СоА в аналогичной реакции проявляет избирательность действия путем специфического деацилирования пируватдегидрогеназного комплекса, но не его пируватдегидрогеназного компонента. Аналогия динамики спектров пируватдегидрогеназы, действующей в составе комплекса и изолированной, отражающая функциональные изменения активных центров фермента в процессе катализа, подтверждает предложенный ранее механизм действия пируватдегидрогеназы и дает методическую основу его прямого исследования в составе комплекса.