БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 8, с. 1488–1494
Кристаллизация свободной аспартатаминотрансферазы из цитозоля сердца кур
Поступила в редакцию 05.12.1990
Аннотация
Предложен новый метод очистки аспартатаминотрансферазы из цитозоля сердца кур, включающий три стадии: фракционирование сульфатом аммония, этанолом, а также кристаллизацию. Метод позволяет получить фермент 99%-ной чистоты при наивысшей для данного фермента удельной активности, выход белка составляет 70%. Методом изоэлектрофокусирования определена изоэлектрическая точка фермента, находящаяся при pH 5,95. Из раствора сульфата аммония методом равновесной диффузии со свободной поверхности получены крупные, пригодные для рентгеноструктурного анализа высокого разрешения, кристаллы свободной трансаминазы. Кристаллы принадлежат к пространственной группе P212121 и имеют следующие параметры элементарной ячейки: α=62,7 Å, b=118,1 Å, с=124,5 Å. В независимой части ячейки кристалла находится одна молекула белка, во всей ячейке – четыре молекулы.