БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 8, с. 1374–1384
Очистка и свойства мембраносвязанной формы трегалазы из грены тутового шелкопряда
Поступила в редакцию 18.04.1990
Аннотация
Разработан метод выделения и очистки мембраносвязанной формы трегалазы из грены 9-го дня постдиапаузного развития. Процедура очистки включает следующие стадии: фракционирование белков сульфатом аммония и снижением pH раствора до 4,0, ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе, гель-фильтрацию на ультрагеле АсА-44 и препаративный электрофорез в градиенте концентрации от 3,5 до 15% полиакриламидного геля. Полученный ферментный препарат очищен в 150 раз. Фермент является кислым мономерным белком с молекулярной массой 77 кДа. Изоэлектрическая точка белка 4,25. Фермент стабилен при низких температурах, а при температуре выше 50° наблюдается его быстрая инактивация. Оптимум pH для реакции гидролиза α,α-трегалазы 5.5, Кт= 0,22 мМ.