БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 7, с. 1312–1321
Надмолекулярная организация аполипопротеина E в растворе
Поступила в редакцию 15.11.1990
Аннотация
Изучены агрегационное состояние и стабильность в растворе аполипопротеина Е, выделенного из липопротеидов очень низкой плотности плазмы крови человека. Равновесный процесс денатурации флуоресцеинмеченого апоЕ гуанидингидрохлоридом, исследованный по анизотропии и суммарной интенсивности флуоресценции, сдвигу максимума спектра испускания и гель-хроматографическому поведению, характеризовался обратимостью, двухфазностью, зависимостью от концентрации апоЕ, существованием нативной структуры мономерной формы апобелка. Вклад долгоживущей компоненты в кинетическую зависимость анизотропии флуоресценции в присутствии 6 М денатуранта увеличивался при возрастании концентрации апобелка. Результаты удовлетворяют схеме: олигомер (при старении препарата) ↔ тетраметр ↔ нативный мономер ↔ денатурированный мономер. Предположено существование двух доменов в тетрамерной структуре апоЕ, один из которых сформирован липидсвязывающими фрагментами при агрегации индивидуальных молекул апобелка. Моноклональное антитело 3D12F11 подкласса IgGl характеризовалось высоким сродством к апобелку Е (Ad=3,5±0,5 нМ) и не влияло на связывание апобелка с гепарин-сефарозой и вызванную апобелком деструкцию липосом из дипальмитоилфосфатидилхолина. Предположено, что эпитоп к изученному антителу локализован вне гепарин- и липидсвязывающих участков молекулы апобелка.