БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 6, с. 999–1010
cGMP-активируемая фосфодиэстераза из мозга человека: кинетические и регуляторные свойства
Поступила в редакцию 07.08.1990
Аннотация
Исследована cGMP-активируемая фосфодиэстераза из мозга человека. Фермент характеризует линейная для сАМР и нелинейная для cGMP зависимость скорости реакции от концентрации субстрата. cGMP в микромолярных концентрациях ускоряет гидролиз сАМР в 7—14 раз. Кажущаяся константа активации равна 0,36 мкМ. Увеличение скорости гидролиза сАМР сопровождается уменьшением Кm без изменения Vmax. При концентрации cGMP свыше 5 мкМ активация фосфодиэстеразы сменяется ингибированием. Каждый субстрат является конкурентным ингибитором для другого. Кi для cGMP и сАМР равны 30 мкМ. Ускорение гидролиза 5 мкМ сАМР под действием дибутирильных аналогов циклических нуклеотидов cAMP(Bt)2 и cGMP(Bt)2 сопровождается процессом ингибирования фермента. Оба аналога конкурентно ингибируют гидролиз cGMP со значениями Ki для cGMP(Bt)2 и cAMP(Bt)2 10 и 1500 мкМ соответственно. Полученные результаты позволяют предположить наличие на молекуле фермента двух участков связывания циклических нуклеотидов: высокоспецифичного для cGMP регуляторного центра и каталитического, гидролизующего оба субстрата и не обладающего явно выраженной специфичностью к сАМР и cGMP. Неидентичность сродства природных и синтезированных соединений к этим центрам в значительной степени определяют аминогруппы во втором и шестом положениях пуринового кольца.