БИОХИМИЯ, 1991, том 56, вып. 5, с. 828–838
Окислительное иодирование IgG кролика: локализация метки в Fc-фрагменте и эффекты модификации
Поступила в редакцию 09.07.1990
Аннотация
Исследованы нативные и модифицированные в реакции окислительного иодирования иммуноглобулины: поликлональный IgG кролика и его анти- генспецифичная фракция. В качестве окислителя применен иодоген. Для регистрации конформационных изменений использованы «зонды» на различные участки молекулы IgG: поликлональные антитела к СН2 домену, белок А стафилококка, и белковый антиген ферритин, тестирующий конформационное состояние антигенсвязывающих Fv доменов. Пепсиновым протеолизом [125I]IgG показано, что при глубине модификации не более 0,1 атома йода-125 на молекулу IgG наблюдается домен-селективная модификация антител: от 80 до 92% метки локализовано в СHЗ домене. Несмотря на это существенные конформационные изменения молекулы IgG зарегистрированы с помощью трех вышеназванных «зондов» не только в СН2 домене и зоне контакта СН2 и СНЗ доменов, но и в Fv домене. Прямое сравнение функциональных параметров нативного и модифицированного йодом-125 IgG позволило установить, что основным: повреждающим фактором окислительного йодирования является действие йодогена, а не введение атома йода в фенольное кольцо остатков Туг молекулы IgG.